Assassin's Creed II представляет нового героя, юного итальянского аристократа Эцио Аудиторе да Фиренце, и новую эру - эпоху Возрождения. Assassin's Creed II рассказывает эпическую историю семейных уз, заговоров и мести, действие которой происходит в непорочной, но жестокой Италии эпохи Возрождения. Эцио заручается дружбой Леонардо да Винчи, вступает в конфликт с самыми влиятельными семьями Флоренции и отправляется в опасное путешествие по каналам Венеции, в котором он станет мастером ассасинов.